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液相色譜(HPLC) 法測血清維生素C 含量.pdf
2008/12/23 [4456]

極易氧化, 這使其測定具有很大難度。據(jù)報(bào)道, 測定
維生素C 常用以氧化還原為基礎(chǔ)的比色法或衍生
反應(yīng)為基礎(chǔ)的熒光法, 但這些方法操作復(fù)雜費(fèi)時(shí),
在樣品處理過程中很容易使維生素C 損失, 且沒
有高的靈敏度和度[ 1, 2 ]。為了尋找更好的維生
素C 測定方法, 使其更適用于社區(qū)或流行病學(xué)研
究, 筆者通過對色譜條件的優(yōu)化, 建立了使用先進(jìn)
的二極管陣列檢測器(DAD) 的液相色譜(h igh
perfo rm ance liqu id ch rom atography, HPLC) 法。該
方法具有簡便、快速、準(zhǔn)確、靈敏的特點(diǎn)。
1 材料與方法
111 材料
11111 主要儀器: Beckm an 液相色譜系統(tǒng):
Novean 色譜工作站, 168 型二極管陣列檢測器
(DAD ) , ALL T IMA ODS# C18 柱5 L(250 mm ×
416 mm i. d) , 7752i 手動(dòng)進(jìn)樣器;DL 2120 超聲波清
洗器; GTL 216AL 高速臺式低溫離心機(jī)。
11112 試劑: 維生素C (S IGMA , Chem Co,U SA ,
色譜純) ; 磷酸二氫鉀、磷酸、甲醇、偏磷酸, 以上試
劑均為分析純; 實(shí)驗(yàn)用水為去離子雙蒸餾水。
112 方法
11211 色譜條件的優(yōu)選: 根據(jù)對流動(dòng)相的種類、濃
度及pH 值的優(yōu)選, 本實(shí)驗(yàn)的*色譜條件為: 色
譜柱: ALL T IMA ODSC18 柱5 L( 250 mm × 416
mm i. d) ; 流動(dòng)相: 100mmo l?L KH2PO 4, pH 3. 00,
檢測波長: 243 nm ; 流速: 1 m l?m in; 進(jìn)樣量: 20Ll。
11212 樣品預(yù)處理: 取011m l 血清, 加

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